Диагностика гриппа методом полимеразной цепной реакции
09.01.2020
Грипп и другие острые респираторные заболевания являются наиболее распространенной патологией в структуре инфекционных болезней.
Лабораторная диагностика гриппа проводится для подтверждения клинического диагноза, дифференциации гриппа от ОРВИ другой этиологии и для эпидемиологических целей. Среди существующих методов диагностики гриппа несомненное преимущество принадлежит методу ПЦР, который предназначен не только для выявления, но и субтипирования генетического материала вируса гриппа. Метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, позволяет в кратчайшие сроки установить этиологию заболевания, тем самым назначить специфическую противовирусную терапию и организовать соответствующие профилактические мероприятия, а также избежать необоснованного назначения антибактериальной терапии при гриппе.
Важным моментом исследования является правильный выбор, отбор, хранение и доставка биологического материала. Для диагностики гриппа преимущественно используется биологический материал из дыхательных путей, соответствующий локализации поражения: при заболеваниях верхних дыхательных путей используются мазки из носоглотки и ротоглотки; в случае заболевания нижних дыхательных путей – материал из трахеи, бронхов и легких (мокрота, трахеальный аспират, бронхоальвеолярный лаваж).
Оптимальным сроком забора клинического материала являются первые три дня от момента заболевания. Для забора назофарингиальных мазков используют пластиковые аппликаторы с синтетическим тампоном. Не рекомендуется использовать деревянные палочки с хлопковыми тампонами. Мазки со слизистых оболочек верхних дыхательных путей у пациента берут двумя разными зондами: сначала со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки и объединяют вместе с целью повышения чувствительности исследования. Концы зондов с тампонами после взятия мазков последовательно помещаются в одну пробирку с 1-2 мл транспортной среды или физиологического раствора, выступающие концы зондов отламывают, пробирку герметично закрывают. Взятый материал в течение 1-4 часов доставляют в лабораторию с соблюдением холодовой цепи. Допускается хранение биологического материала в течение 24 ч при температуре 2–8° С, более длительно – при температуре не выше минус 20° С. При нарушении условий хранения генетический материал возбудителя может разрушаться, что приведет к ложноотрицательным результатам. Транспортировка биологического материала в лабораторию осуществляется с соблюдением принципа тройной упаковки согласно рекомендации по правилам перевозки инфекционных материалов ВОЗ/HSE/GCR/2015.2.
Биолог лаборатории вирусологических исследований и диагностики ВИЧ/СПИД О.А.Колесникова